薄层色谱硅胶板

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薄层色谱硅胶板使用的相关介绍

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薄层色谱硅胶板使用的相关介绍

发布日期:2021-04-22 作者: 点击:

1.点样 

将样品溶于适当的溶剂中(应尽量避免有水),取微量注射器或玻璃毛细管截齐后,吸取一定量的检样,轻轻接触到薄层上,使样品自动吸到薄层上,点的直径不要超过0.3厘米,一次不能点完,待干后再点,稍有过分就会损伤板面,影响展开后的斑点形状。每两个样点之间相距至少1.5厘米。点样的起点距薄板底边至少1.5厘米,以免样点浸入展开溶剂中,同块薄层色谱硅胶板上各样点应保持在与底边平行的一条直线上,为控制好点样距离,应用薄层点样尺架。 


薄层色谱硅胶板


2.展开 

根据薄层板大小,自行选用适当玻璃标本缸,长方形,如17×10×6厘米的标本缸可容纳下15×9厘米的玻璃板。采用较大的玻璃缸和玻璃板时,在缸内沿周围缸壁衬一层预先浸有溶剂的滤纸,以便缸内展开溶剂易达到饱和,防止边缘效应(即两边缘的点走得快)和同一物质Rf值不一致现象。 


一般将薄层板斜置展开容器内,密闭。先不使溶剂浸湿薄层板,饱和10~15分钟后再进行展开,展开溶剂沿着薄层板向上移动。对加粘合剂的涂板可以近于垂直的状态进行展开,而对未加粘合剂的薄层板则必须以倾斜状态(15度角)进行展开。为了防止产生“边缘效应”和展开溶剂不饱和现象。还可采用夹心式展开容器,其方法是将薄层板的左右两侧各刮去5~10毫米,垫上条状玻璃或塑料,盖一块与薄层板同样大小的玻璃,用夹子将两边夹好,插入展开溶剂中进行展开,并能取得良好效果。 


3.显色 

薄层展开后,凉干。如含粘合剂,即可直接喷显色剂,使之显色,有的还需经紫外线(254nm)照射后方能显色;对不含粘合剂的薄层色谱硅胶板,在喷显色剂时应尽量远离薄层板,否则会连吸附剂一起吹掉,应予以注意。


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