薄层色谱硅胶板

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薄层色谱硅胶制备板的知识理论

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薄层色谱硅胶制备板的知识理论

发布日期:2018-01-09 作者: 点击:

薄层色谱硅胶制备板的基本概念及机理


1.基本概念:层析法(色谱法)是利用混合物中各组分(或成分)的理化性质的差别,使各组分以不同程度分布在两个不相混溶的相中,由于各组分的不同速度移动,因而达到分离的过程及方法。

层析法分为:纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱、液相色谱法等,我们主要讨论薄层色谱法。

薄层色谱法(层析法)根据层析原理分为二大类:

吸附层析:利用被分离物质在吸附剂上被吸附能力不同,用洗脱液使组分分离,如硅胶G''氧化铝薄层层析。

分配层析:利用被分离物质在两相中分配系数不同使组分分离。如微晶纤维素层析、纸层析等。


2.层析机理:从层析法概念中我们了解任何层析都关系到被分离物质溶质在两相之间的分配,即关系到分配系数(K溶质在固定相中浓度/溶质在流动中浓度的大小''只是在不同层析法中''K有不同的意义。

在吸附层析法中K称为吸附系数。

KXa/Xs“表示在一定温度下达到平衡时”在单位时间内被吸附剂表面吸附的溶质的浓度Xa与从吸附剂表面解吸附到溶剂展开剂中溶质浓度Xs之比。


薄层色谱硅胶板分配层析法:K为分配系数,即在一定温度下达到平衡时,溶质在固定相中的浓度Cs与其在流动中的浓度Cm之比。


薄层色谱硅胶制备板


薄层色谱硅胶制备板中注意的问题:

1.含煅石膏作粘合剂的吸附剂在加水或含CMC的水溶液调匀后,在2分钟内铺板''以免粘合剂固化而使铺板固难。

2.铺板时防止板面有气泡的方法是调匀吸附剂时玻棒顺一个方向搅动,再者在调匀时滴加少许乙醇。

3.铺板时不同吸附剂一般情况下,与溶液之比例为1:3''活化110℃30分钟。

4.关于活化问题,活化就是将吸附剂水分加热去掉的过程,其目的就是增加吸附剂的吸附能力,增加活度。

5.关于活度问题:薄层活化是将吸附剂中水解吸附的过程,但吸附剂与水的结合(氢键)是可逆的。判定吸附能力大小的标志是活度,活度一般分五级,测定过程是将几种染料的配成混合液,在一定条件下展开,检查其分离度大小来判别的。在实际工作中一般不测定活度,但在上述规定活化的条件薄层色谱硅胶制备板的活度一般在Ⅱ-Ⅲ级,注意的是活化好与薄层板应在硅胶干燥剂环境下保存备用。

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