薄层色谱硅胶板点样的注意事项

一、薄层色谱硅胶板点样方式：分为手动点样和自动点样。手动点样主要器具为微量毛细管、微量注射器等。自动点样采用半自动点样仪或全自动点样仪，按预设程序自动点样。手动点样灵活方便，器具以微量毛细管最常用。仪器的自动点样准确性好，常用于薄层扫描法的含量测定。

二、点样方法：分为接触式点样和喷雾点样。喷雾点样为仪器控制。接触式手工点样时，应注意小心用点样器垂直接触薄层板表面以防止损伤板面。若薄层吸附剂表面被损坏或点成洼孔，则展开后斑点成不规则形状: 靠近溶剂前沿的化合物形成三角形，靠近原点的化合物形成新月形，影响测定结果。原点损失带来误差，也将使展开后的定量和判断不准确。

三点样注意事项

1.点样量：原点位置对样品容积的负荷量有限，体积不宜太大，一般为0.5～10μl，样品的浓度通常为0.5～2 mg，太浓时展开剂从原点外围绕行而不是通过整个原点把它带动向前，使斑点拖尾或重叠，降低分离效率。点样量太小，不能检出清晰的斑点影响判断。点样量太多，展开剂不能全部负载，容易产生拖尾现象。当点样量适合时，可采用点状点样。当点样量过大，原点无法负荷时，可采用条带状点样，得到更好的分离效果，提高分辨率。

2.样品的溶剂：样品在溶剂中溶解度很大，原点将变成空心圆，影响随后的线性展开，所以原则上应选择对被测成分可以溶解但溶解度不是很大的溶剂。供试液的溶剂在原点残留会改变展开的选择性，亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分对色谱质量也会产生影响，因此除去原点残存溶剂是必要的，但对遇热不稳定和易挥发的成分，应避免高温加热，以免成分被破坏或损失。

3.点样的手法：接触式点样直径通常在3mm以内，采用边点样边用吹风机吹干溶剂的方式。在同一原点进行多次点样时，要尽可能使每次的点样环中心重合、直径大小一致，以免形成多个环状，在原点的不均匀分布将使展开后的色谱图带不够清晰和整齐。

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